See artikkel on pühendatud sademereaktsiooni nähtusele. Siin käsitleme selle nähtuse sõnastuse iseärasusi, difusiooninähtust, üldisi omadusi, rolli inimelus ja palju muud.
Sissejuhatus nähtusesse
Sade on seroloogilist tüüpi nähtus, mille käigus lahustuvad antigeenid interakteeruvad antikehadega ja selle tulemusena täheldatakse sadenemist – sadet.
Sadestusreaktsiooni üldine tunnus on antigeeni ja antikeha koordineeritud mõju. Seda tüüpi interaktsioonid võimaldavad teadaolevate antikehade ja antigeenide lisamise teel määrata tundmatute antigeenide olemasolu uuritavas aines. Sadestamisprotsess ilma sooladeta kulgeb halvemini ja parim optimum jääb vahemikku 7,0–7,4 pH.
Reaktsiooni koostisosad
Sadestamisreaktsiooni komponentide hulgas on kolm põhielementi:
- Molekulaarse olemusega antigeen. See on peentüübi olekus, teisisõnu, seelahustuv. Samuti nimetatakse sellist antigeeni sademeks, mis on lüsaat või koeekstrakt jne. Sademeel on iseloomulik erinevus aglutinogeenist, mis seisneb osakeste suuruses, millest see koosneb. Aglutinogeenil on omane raku suurus ja sademed on proportsionaalsed molekuli suurusega. Antigeenilahust iseloomustab läbipaistvus.
- Inimese vereseerumis ja ka immuundiagnostilises seerumis leitud antikeha, mis sisaldab uuritud antikehi.
- Elektrolüüdid on naatriumkloriidi lahused, mis on isotoonilised.
Precipitogeeni tootmine
Sadestamisreaktsiooni seadistamine on võimatu ilma sademeta, mis saadakse materjalide jahvatamisel ja nendest valguantigeenide ekstraheerimisel. Ekstraheerimine toimub keetmise või muul viisil.
Lüsaadid, aga ka kudede ja elundite ekstraktid, vereseerum, erinevat tüüpi filtraadid, mis põhinevad mikroobse puljongikultuuridel, samuti mikroorganismide soolaekstrakt ja autolüsaatained on silmatorkavad. näide sademetest.
Seadistamine sademete käes
Nüüd vaatleme sadestamisreaktsiooni seadistamise meetodit.
Toimub ringsadestamise reaktsioon, mis toimub spetsiaalselt ettevalmistatud katseklaasides. Nõude õõnsustesse sisestatakse seerum, valades pipetitila abil üle seina. Järgmisena kantakse peale ettevaatlikult kihiti sobiv kogus sadet ning seejärel viiakse toru horisontaalsest vertikaalasendisse. Sademete reaktsiooni seadistamine ja arvestamine on väga hoolikas toiming. Tulemus registreeritakse pärast valge rõnga ilmumist antigeeni ja antikeha vahelisele piirile. Kui reaktsiooni reageerivad elemendid vastavad üksteisele, siis nad seostuvad, kuid see muutub märgatavaks pärast nende pikaajalist koostoimet
Sadestamisreaktsioon viiakse läbi ka Petri tassis või klaasil slaid, kuhu kantakse agargeel, kandes seda väikese kihina. Pärast geelis kõvenemist lõigatakse välja väike arv süvendeid, kuhu asetatakse antigeenid ja antikehad. Selle toimingu teostamiseks on kaks võimalust: radiaalne immunodifusioon ja topeltimmunodifusioon.
Üldine teave
Sademete töö mehaanika on sarnane aglutinatsiooniseadmega. Immuuntüüpi seerumi mõjul vähendab juba reaktsiooni astunud antigeen selle hajutatuse astet. Oluline tingimus on nii seerumi kui ka antigeeni läbipaistvus.
Reaktsiooni registreerimist saate parandada, kui asetate antigeenid antikehadele. Selle tulemusena võib täheldada sademete tekkimist rõnga kujul. Seda nähtust nimetatakse ringsadeseks ja see viiakse läbi spetsiaalsetes torudes, mille läbimõõt on 2,5–3,5 mm. Üks levinumaid sademereaktsiooni näiteid on siberi katku diagnoos.
Sade võimaldab määrata difteeriakultuuri toksilisuse taset agaris.
Vaatatava reaktsiooni käigustoimub antigeensete komplekside ja antikehade sadestumine. Sade on immunoloogiline nähtus, mis võimaldab määrata antikehade kogust haige või vaktsineeritud inimese ja loomade vereseerumis.
Tiitrimise tagajärg
Oluline on teada, et ül altoodud meetodi tiitrimisel saadud andmed ei ole kvantifitseeritavad. Sisalduvate antikehade arvu kvantitatiivse hinnangu loomiseks ja analüüsimiseks töötasid M. Heidelberger ja E. Kabat välja spetsiaalse reaktsioonitehnika, mis põhineb ekvivalenttsooni otsingul ja tuvastamisel. Antigeenide vanusenumbri segamine konstantse antiseerumi mahuga viib algselt moodustunud sademe suurenemiseni ja seejärel jälle väheneb antigeenikomplekside lahustumisvõime suurenemise tõttu. Määrates antikehade koguse igas katseklaasis sisalduvates supernatantides, saate teada, et teatud arvul antikehi sisaldavatel nõudel puudub vedelik. Siin moodustub teiste katseklaasidega võrreldes suurim sade. Tänu sellele ja valkude koguväärtusest antigeense valgu sademe lahutamisele on võimalik saada konkreetse uuritava seerumi mahus sisalduvate antikehade täpne väärtus. Lisaks määratakse sademe valgumolekulide kogus lämmastiku koguse järgi või kolorimeetriliste meetodite abil.
Väärtuste hindamine
Diagnostilise metoodika sademete väärtuste hindamisel tuleks arvesse võtta võimalust, et immuunseerumis võib esineda antikeha, millel ei ole sadestumise omadust, millest järeldub, et sade ise ei pruugi olla moodustub pärast reageerimist antigeenidega. Selliste molekulide loend sisaldab mittetäielikke antikehi ja mõningaid liike gamma-A globuliinide rühmast.
Laboritingimustes toimuv sadenemisreaktsioon leiab oma rakendust erinevat tüüpi modifikatsioonides. Näiteks kasutatakse termosadestamise reaktsiooni botulismi, siberi katku jne bakteriaalsete antigeenide tuvastamiseks, mis ei läbi termilist denaturatsiooni. Erinev alt ringsadestamisest kasutatakse seda tüüpi reaktsioonis kõnealuse materjali keedetud olekus filtraate.
Keerulises segus sadestamise reaktsiooni analüüs ei võimalda iseloomustada segu üksikute elementide omadusi. Sellistel juhtudel kasutab inimene agar-sadestamise meetodit ja kasutab ka immunoelektrofereesi.
Hajutatud sademed
Selles uurimisvaldkonnas on difuusse sademereaktsiooni (RPD) kontseptsioon. See põhineb antikehade ja lahustuvate antigeenide võimel difundeeruda geelis. Difusioon on teatud aine molekuli võime tungida teise aine molekulidesse, mis on põhjustatud termilisest liikumisest.
Geel on hajutatud tüüpi süsteem, milles vedel faas jaotub tahkes faasis ühtlaselt. Kõige sagedamini kasutatakse selliseks reaktsiooniks agargeeli.
Pärast parameetrite andmistTingimustes, milles molekulid võivad üksteise suhtes difundeeruda, kaasneb nende kohtumisega antigeeni + antikeha kompleksi moodustumine. Selline neoplasm on võimeline hajuma, olles geelis endas, ja see sadestub, võttes palja silmaga tuvastatava riba kujul. Kui antigeen ja antikeha on homoloogsed, siis riba ei teki.
Agarkihis viibimise ajal difusiooni toimumise tingimuste loomine hõlmab komponentide valamist, kuid süvendite koguarv ja nende suhteline asukoht määratakse otsustada nõutava ülesande tüüp. RPD annab inimesele võimaluse tuvastada ja tuvastada tundmatuid isoleeritud viirusi, testides teadaolevate antikehaseerumite abil.
Rakendus
Sademeid kasutatakse laialdaselt mitte ainult haiguste diagnoosimisel, vaid leiab rakendust ka kohtuarstlikus ekspertiisis. Raske on ette kujutada analüüsi, mille käigus oleks võimalik määrata sadereaktsiooni mittekasutava kuriteorelva küljes leitud vere, organi osa või koe liiki. Selle protsessi käigus kasutatakse sadestavaid seerumeid, mis saadakse erinevate loomade ja lindude immuniseerimisel. Oluline on, et seerumi tiitri tase ei oleks väiksem kui 1:10000 ja see peab olema ka piisava spetsiifilisusega. Avastatud verelaigust või selle koorest tehakse väljavõte füüsiliseks. lahendus, millega edasi kokku puututaksesadestav seerum. Selle reaktsiooni järgi on võimalik kindlaks teha nii inimeste kui ka loomade kudede ja elundite valkude tüübid. Hägusate ekstraktide saamine sunnib kasutama agaril sadet.
Järeldused
Loetud teavet analüüsides võime järeldada, et sademereaktsioonid on inimese jaoks äärmiselt olulised, kuna võimaldavad diagnoosida erinevaid antigeene antikehade abil, seda nähtust kasutatakse laialdaselt ka kohtumeditsiinilises läbivaatuses ja see võimaldab tuvastada, mis tüüpi veri, kude või organ seoses konkreetse subjektiga. Sademeid on mitut tüüpi ja meetodeid, mida kasutatakse vastav alt lahendatava probleemi esilekerkivatele vajadustele.
