Mikroskoopilise vaatluse sukeldumismeetod hõlmab spetsiaalse vedeliku sisestamist seadme läätse ja uuritava objekti vahele. See suurendab heledust ja laiendab pildi suurenduse ulatust. Seega saab objekti oluliselt sisse suumida ja selle väikseimaid elemente uurida ilma aparatuuri vahetamata. Sellest lähtuv alt nimetatakse vedelikku sukeldamiseks. Seda saab kasutada mitmesuguste kompositsioonidena. Kõige populaarsem on keelekümblusõli. Mõelge selle funktsioonidele üksikasjalikum alt.
Üldteave
Esimene mikroskoopia immersiooniõli oli seeder. Siiski oli sellel üks oluline puudus. Aja jooksul selle omadused muutusid ja see ei võimaldanud soovitud tulemusi saavutada. Õues hakkas vedelik tasapisi kondenseeruma (kuni kõvenemiseni). Sellest lähtuv alt muutus ka murdumisnäitaja. 20. sajandil hakati tootma sünteetilist immersioonõli. Sellel vedelikul ei olnud ülalnimetatud puudust.
Kämblusõli standardid
Võtivedeliku parameetrid on sätestatud GOST 13739-78. Vastav alt standardile on immersiooniõlil:
- murdumisnäitaja nd=1,515±0,001;
- läbilaskvus spektrivahemikus 500–700 nm kihi paksusega 1 mm – 95%, 400–480 nm – 92%;
Sukeldusõli optimaalne temperatuur on 20 kraadi. Samuti on olemas rahvusvahelised standardid. Vastav alt standardile ISO 8036/1 on murdumisnäitaja 1,518 + 0,0005 ja läbilaskvus 10 mm kihil spektrivahemikus 500–760 nm on 95% ja 400 nm juures 60%.
Näitud parameetrid vastavad mittefluorestseeruvale immersioonõlile. Standard ISO 8036-1/2 määratleb vedeliku luminestsentsi omadused. Läbilaskvus spektrivahemikus 500-700 nm 10 mm kihis on 95%, 365-400 nm - 60%.
Parameetrite lahknevustega seotud raskused
Tuvastatav erinevus ül altoodud standardites võib sobimatu vedeliku kasutamisel põhjustada konkreetse objektiivi jõudluse halvenemist. Tulemus:
- Sfäärilise aberratsiooni tõttu on kontrast vähenenud.
- Uurimisobjekti väli on värviline.
- Valgustus uuritava objekti tasapinnas ja selle kujutise moodustamise piirkonnas muutub ebaühtlaseks.
- Pilt muutub uduseks.
Nüansid
Optilistel mikroskoopidel on eraldusvõime ülempiirnatuke rohkem kui 100 korda. Sellel suurendustasemel peaks uuritava objekti valgustus olema kvaliteetne. Vastasel juhul on saadud pilt nii tume, et objekti on võimatu näha. Fakt on see, et valguse murdumine ja hajumine toimub katteklaasi ja objektiivi vahel. Sukeldusõli aitab kaasa selle suuremale püüdmisele. Selle tulemusena muutub pilt selgemaks.
Valguse murdumise omadused
Kuidas saada selget pilti? Erinevates meediumites toimub valguse murdumine erineval viisil. Näiteks kiirte murdumisnurgad õhus ja klaasis on erinevad. Esimesel juhul on indikaator 1,0, teisel - 1,5. See on peamine probleem.
Õli kasutamine võimaldab vähendada uuritavat objekti läbivate kiirte murdumisnäitajat. Fakt on see, et vedelikul on sama parameeter kui klaasil. Selle tulemusena tekib slaidi ja läätse vahele homogeenne keskkond ning suurem osa objekti läbivast valgusest satub instrumenti. Tulemuseks on selge pilt.
Tehnilised punktid
Reeglina on sukelläätsede silindritesse graveeritud õli. Elementi ennast kasutatakse siis, kui on vaja 1,0 või suuremat ava. Selliseid "immersioon" läätsi kasutatakse otseseks vedelikku sukeldamiseks. Sellega seoses on need täielikult suletud. See tagab läätsedele kõrge kaitse õlikahjustuste eest.
Klassifikatsioon
Praktikas kasutatakse õlisidkaks viskoossust: kõrge (tüüp B) ja madal (A). Sageli leiate pakendilt teavet murdumisnäitaja kohta. Näiteks toodavad nad immersioonõli (100 ml), mille murdumisnäitaja on 1,515. Madala viskoossusega vedelikke kantakse õhuruumi ja kõrge viskoossusega vedelikke koos kondensaatoritega.
Kasutustingimused
Uuritavast objektist selge pildi saamiseks peate järgima üsna lihtsaid soovitusi:
- Leidke uuritav objekt välja keskel asuv alt liugurilt väikese suurendamisega. Selleks kasutatakse väikese suurendusega objektiivi.
- Pöörake torni.
- Sisestage objektiiv 100x tööasendisse.
- Tiisake tilk õli slaidiklaasile ja teine tilk objektiivile.
- Reguleerige töökaugust peenfookusega, kuni objekt on selgelt nähtav.
Töötamisel tuleb olla ettevaatlik. Oluline on vältida õhu sattumist katteklaasi ja objektiivi vahele.
Keelekümblusõli "Minimed"
Vedelikut kasutatakse mis tahes tüüpi seadmete akromaatiliste ja apokromaatiliste läätsedega töötamisel, välja arvatud luminestsentsläätsede puhul. Seda keelekümblusõli kasutanud ekspertide sõnul on sellel mitmeid kasulikke omadusi. Vedelik parandab oluliselt objekti nähtavust, minimeerides pimestamist, valguskadu ja optilisi aberratsioone. Õli kasutamine laiendab oluliselt seadmete võimaluste valikut.
Puhastusvarustus
Pärast immersiooniõliga töötamist on vaja seade korda teha. Enne läätse kuivamist tuleb puhastada. Õlijääkide eemaldamiseks kasutatakse puhast läätsepaberit. Kõikide klaaspindade puhastamiseks kasutatakse v altsitud lehte. Läätsepaber tuleb niisutada läätselahusega ja ülejäänud õli tuleks eemaldada.
Ajalooline taust
Esimene teadlane, kes selgitas keelekümbluse mehhanismi, oli Robert Hooke. 1678. aastal ilmus tema raamat Microscopium, milles olid ära toodud kõik selgitused. Aastal 1812 pakuti keelekümblust kui vahendit objektiivi aberratsioonide korrigeerimiseks. Idee autor oli David Buster. 1840. aasta paiku valmistati esimesed keelekümblusläätsed. Nende looja oli D. B. Amici. Algselt kasutasid teadlased sukeldusvedelikuna aniisiõlisid. Murdumisnäitaja oli klaasi omale lähedane.
