Kaasaegses meditsiinis on spetsiifilised diagnostilised meetodid, mis võimaldavad kindlaks teha inimeste haiguste etioloogiat patogeeni määratluse, immuunvastust stimuleerivate geneetiliselt võõraste ainete, nukleiinhapete, aga ka allergiliste ja immuunmuutuste põhjal. mis tekivad tema tegude tõttu. Tänapäeval kasutatakse RIA-d laialdaselt immunoloogias ja viroloogias, see tähendab radioimmunoanalüüsis, mille eesmärke, komponente, kursust, mille arvestust käsitleme, käsitleme selles artiklis. See analüüs suudab tuvastada antigeene nende vastastikmõju tõttu antikehadega.
Definitsioon
RIA on vedelikes leiduvate bioloogiliselt aktiivsete ainete diagnoosimise meetod, mis põhineb antigeenide reaktsioonil antikehadega radionukliidiga märgistatud analoogsete ainete kasutamisel, millel on erilised sidumissüsteemid. Pärast nende suhtlemistmoodustub immuunkompleks, mis eraldatakse ja uuritakse selle radioaktiivsust. On teada, et radioimmunoanalüüs tehakse standardsete reaktiivide komplektidega.
Iga reaktiiv suudab määrata ühe konkreetse aine kontsentratsiooni. Inimeselt võetud bioloogiline vedelik segatakse reagendiga, pärast inkubatsiooniperioodi eraldatakse vabad ja seotud radioaktiivsed ained, seejärel tehakse radiomeetria ja arvutatakse tulemused. Ainete märgistamiseks kasutatakse joodi isotoopi. See on märgitud ja lisatud teatud summas.
Rakendus
Radioimmuunanalüüsil on laialdane rakendus meditsiinis ja mikrobioloogias. Seda kasutatakse südame- ja veresoonkonnahaiguste, endokriinsete ja teiste kehasüsteemide haiguste diagnoosimiseks. RIA-d kasutatakse sageli ka viljatuse põhjuse, loote arengu patoloogia tuvastamiseks. Onkoloogias tehakse seda analüüsi neoplasmide markerite määramiseks, et oleks võimalik jälgida ravi efektiivsust. Immunoloogias kasutatakse RIA-d immunoglobuliinide, ensüümide, valkude jms sisalduse uurimiseks veres. Tänapäeval võimaldab see analüüs tuvastada erinevate hormoonide kontsentratsiooni kuni miljondiku ühe grammi ulatuses. Seega kasutatakse radioimmuunset vereanalüüsi laialdaselt kardioloogias, onkoloogias, endokrinoloogias, günekoloogias ja viroloogias.
RIA meetodid
Sõltuv alt iseloomust on tavaks eristada mitut analüüsimeetoditreaktsioonid:
- Mittekonkureerivat meetodit iseloomustavad sellised reaktsioonikomponendid nagu standardsed ja tuvastatavad antigeenid, puhverlahus, isotoopmärgistatud antikehad, teatud sorbendiga seonduvad antikehad. Uuritavatele antikehadele lisatakse antigeen. Pärast inkubeerimist tekivad antigeen-antikeha kompleksid, sorbenti pestakse, lisatakse märgistatud antikehad, mis seonduvad kompleksis oleva antigeeniga. Radioaktiivsus sõltub testitava antigeeni kontsentratsioonist.
- Konkurentsivõimelist radioimmuunanalüüsi juhib antigeenide konkurents. Siin on sellised reaktsiooni komponendid nagu kontroll- ja määratud antigeenid, puhverlahus, teatud sorbendiga seonduvad antikehad, aga ka isotoopmärgistatud antigeen. Diagnoos algab uuritava antigeeni sisestamisega. Sorbendil moodustub antigeen-antikeha kompleks. Seejärel sorbenti pestakse ja märgistatud antigeen süstitakse. Seejuures seondub see antikehaga. Loendurite abil mõõdetakse reaktsiooni ja radioaktiivsuse kogust. See on pöördvõrdeline antigeeni kogusega proovis.
- Kaudne meetod on kõige levinum. Sel juhul on reaktsioonikomponendi radioimmunoanalüüsis näiteks kontroll- ja testseerum, sorbendiga seotud antigeenid või antikehad, isotoopidega märgistatud antikehad, puhverlahused. Diagnoositud antikehad või antigeenid reageerivad sorbendiga seotud antigeenide või antikehadega. Seejärel eemaldatakse inkubeeritud aine, süstitakse märgistatud antikehad, mis seonduvadantigeen-antikeha kompleksid.
Analüüsi metoodika
Seega, radioimmunoanalüüs viiakse läbi spetsiaalsete reaktiividega. Komplektid on standardsed, seega kõik vead või rikkumised ei ole lubatud. Diagnostilised tulemused on usaldusväärsed. Analüüs tehakse hommikul, selleks võetakse inimeselt venoosset verd. Laboris eraldatakse verest seerum, mida kasutatakse RIA jaoks. See seerum segatakse reaktiividega. Saadud segu inkubeeritakse etteantud temperatuuril termostaadis.
Saadud segus eraldatakse vabad ja seotud isotoobid. Pärast seda vaadatakse saadud materjal läbi ja arvutatakse tulemused. Radioimmuunanalüüsi mehhanismil on mitu võimalust. Ülalkirjeldatud tehnika on vedelfaasi RIA, kuna kõik komponendid on vedelas olekus. Seal on RIA ja tahke faas, kus antikehad asetatakse kandjasse, mis ei lahustu vedelikus.
Diagnostika kättesaadavus
Selle diagnostikameetodi kasutamine meditsiinis muutub iga aastaga üha populaarsemaks. Viimasel ajal on radioimmunoanalüüs muutunud standardseks diagnostikameetodiks, mille saab lõpliku diagnoosi tegemisel määrata arst. Pikka aega viidi seda tüüpi analüüse läbi ainult laborites, tänaseks on sellest saanud tavaline uurimismeetod. Kuid RIA nõuab kallite seadmete (gamma loendurid) kasutamist ja reaktiivikomplektide kasutusiga on lühike. Kõik see on sellise analüüsi peamine puudus, mis määrab sellekallis kulu.
Lisaks on RIA viimasel ajal hakanud välja tõrjuma moodsamaid uurimismeetodeid, mis ei vaja interaktsiooni isotoopidega. Nende hulka kuuluvad ensüümi immuunanalüüs. Seega on RIA soovitav paljudes kliinikutes. Seda on pikka aega kasutatud suurtes linnades ja diagnostikakeskustes, kuid väikelinnade tavalistes haiglates seda analüüsi selle kõrge hinna tõttu praktiliselt ei kasutata.
RIA väärikus
Radioimmuunanalüüsil on palju eeliseid. See on üsna spetsiifiline ja kõrge tundlikkusega, mis võimaldab määrata bioloogiliselt aktiivsete ainete olemasolu uskumatult väikestes kogustes. See analüüs viiakse läbi väga lihts alt, inimene peab annetama ainult veeniverd. Testi tulemused on 100% täpsed ja valmis juba järgmisel päeval. RIA-d saab ka lihts alt automatiseerida. Seega võimaldab see analüüs tuvastada valgud, mis on nakkuslike bakterite jääkproduktid, mis näitab infektsiooni olemasolu kehas.
Diagnoos viroloogias
Kõige lootustandvam RIA on viroloogia jaoks, sest see võimaldab kiiresti tuvastada viiruspatogeene. Selle põhjuseks on asjaolu, et viimastel aastatel on kasvanud haigestumine erinevatesse nakkustesse, mis levivad suure kiirusega, põhjustades inimeste suremust. See kehtib eriti riikide kohta, millel pole kõrget tasetsotsiaalse ja majandusliku arengu (Kaug-Ida riigid) puhul on radioimmuunanalüüs siin lihts alt hädavajalik. Mikrobioloogia kasutab seda diagnostilist meetodit ka patogeensete bakterite põhjustatud nakkushaiguste tuvastamiseks. Näiteks RIA-d kasutatakse laialdaselt kõhutüüfuse tuvastamiseks. Haiguse esimestel päevadel, enne ravi määramist, on vaja läbi viia väljaheidete ja oksendamise uuring. Diagnostilised tulemused saadakse aga pika aja pärast. Siin tuleb appi RIA, analüüs võimaldab lühikese aja jooksul tuvastada haiguse tekitaja. Inimene loovutab verd, järgmisel päeval on uuringu tulemused valmis. See analüüs aitab panna täpset diagnoosi.
Tulemused
Radioimmunoanalüüs on praegu üks tundlikumaid diagnostikameetodeid. Seda kasutatakse mis tahes aine analüüsimiseks, mille vastu on võimalik saada antikehi. See meetod võimaldab teha palju proove uuritava vedeliku väikseimas mahus, samuti salvestada tulemused võimalikult lühikese aja jooksul, kuna seda saab täielikult automatiseerida. Selle analüüsi töötas välja 1950. aastatel Solomon Burson. Kolmkümmend aastat hiljem sai see lai alt levinud. Praeguseks pole RIA-le sada protsenti alternatiivi, kuna analüüs on kõrge tundlikkusega. RIA-d kasutatakse erinevates meditsiiniharudes, aga ka mikrobioloogias ja viroloogias.
Lõpuks ometi
Meetodi kasutamine viroloogias on tänapäeval väga aktuaalne, kuna annabvõime uurida infektsioonide levikut, panna täpset diagnoosi ja määrata spetsiifiline ravi. See probleem on eriti aktuaalne madala majandus- ja sotsiaalse arenguga riikide jaoks. Samuti võimaldab see analüüs tuvastada hormoonide ja ensüümide kogust inimkehas. Usaldusväärsete tulemuste saamiseks peab uurija analüüsiks annetama vaid verd. Meditsiin ei seisa paigal, koos radioimmuunanalüüsiga ilmuvad uued uurimismeetodid, kuid RIA on jätkuv alt meditsiinidiagnostika üks liidritest.
