Bakterite uurimine nõuab põhjalikku tööd paljude seadmete ja instrumentidega. Mikroorganismide võimalikult kiireks paljunemiseks laboritingimustes ja normaalse elutegevuse säilitamiseks kasutatakse spetsiaalseid toitekeskkondi. Nende koostis ja biofüüsikalised tingimused sobivad bakterikultuuri aktiivseks kasvuks.
Toitainekeskkond. Mikrobioloogia ja muud rakendused
Bakterikolooniaid kasvatatakse laboris tarretise või poolvedela sisuga täidetud Petri tassidel. Need on toitekeskkonnad, mille koostis ja omadused on võimalikult lähedased looduslikele, et tagada kõrgekvaliteediline saagikasv.
Selliseid keskkondi kasutatakse mikrobioloogilistes uuringutes ja meditsiinidiagnostika laborites. Viimased töötavad kõige sagedamini patogeensete või oportunistlike bakterite määrdudega, mille süstemaatiline asukoht määratakse otse asutuses.
Looduslik ja sünteetilineKolmapäev
Bakteritega töötamise põhireegel on toitainekeskkonna õige valik. See peab vastama paljudele kriteeriumidele, sealhulgas mikro- ja makroelementide, ensüümide sisaldusele, happesuse püsiväärtusele, osmootsele rõhule ja isegi õhu hapnikusisaldusele.
Toitainevad söötmed jagunevad kahte suurde rühma:
- Looduslik keskkond. Sellised segud valmistatakse looduslikest koostisosadest. See võib olla jõevesi, taimeosad, sõnnik, juurviljad, taime- ja loomakuded, pärm jne. Selliseid keskkondi iseloomustab kõrge looduslike kemikaalide sisaldus, mille mitmekesisus soodustab bakterikultuuri kasvu. Vaatamata nendele ilmsetele eelistele ei võimalda looduskeskkond spetsiifiliste bakteritüvedega spetsiifilisi uuringuid.
- Sünteetiline kandja. Need erinevad selle poolest, et nende keemiline koostis on teada kõigi koostisosade täpses vahekorras. Sellised söötmed valmistatakse ette konkreetse bakterikultuuri jaoks, mille metabolism on uurijale ette teada. Tegelikult on sel põhjusel võimalik luua selline sünteetiline keskkond mikroorganismide arendamiseks. Neid kasutatakse bakterite elutähtsa aktiivsuse analüüsimiseks. Näiteks saab teada, milliseid aineid ja kui palju nad keskkonda eritavad. Mikroorganismid kasvavad ka looduslikus keskkonnas, kuid ainete esialgsete proportsioonide teadmatuse tõttu on võimatu jälgida koostise kvantitatiivseid muutusi.
Diferentsiaal-diagnostikakeskkonnad
Bakteritega töötamisel ei saa kasutada mitte ainult tavalist toitainekeskkonda. Mikrobioloogia on laiaulatuslik teadus ja seetõttu tuleb mõnikord uuringu läbiviimisel mingil põhjusel teha mikroorganismide valik. Diferentsiaaldiagnostika söötmete kasutamine laboris võimaldab valida Petri tassil soovitud bakterikolooniad vastav alt nende elutegevuse biokeemilistele tunnustele.
Selliste keskkondade koostis sisaldab alati järgmisi komponente:
1. Toitained rakkude kasvu jaoks.
2. Analüüsitud substraat (aine).
3. Indikaator, mis annab teatud reaktsiooni korral iseloomuliku värvi.
Näiteks on diferentsiaaldiagnostiline toitekeskkond "Endo". Seda kasutatakse laktoosi lagundavate bakterikolooniate väljavalimiseks. Esialgu on sellel söötmel roosakas värvus. Kui mikroorganismide koloonia ei suuda laktoosi lagundada, omandab see tavalise valge värvuse. Kui bakterid suudavad selle substraadi lagundada, muutuvad nad iseloomulikuks helepunaseks.
Valikaine kolmapäevad
Diagnostikalaborites kasutatakse sageli palju erinevat tüüpi baktereid sisaldavaid tampoone. Ilmselgelt on kvaliteetse töö jaoks vaja kümnete autsaiderite seast kuidagi välja valida meile vajalikud kolooniad. Siin võib abiks olla bakterite kasvukeskkond, mis sobib ideaalselt toetama ainult ühte tüüpi mikroorganisme.
Näiteksselline valikkeskkond sobib ainult Escherichia coli paljundamiseks. Pärast paljude bakterite külvamist Petri tassile näeme ainult sama Escherichia coli kolooniaid ja mitte rohkem. Enne tööle asumist on vaja hästi tunda uuritava bakteri ainevahetust, et eduk alt selekteerida see teiste liikide segust.
Tahke, pooltahke ja vedel sööde
Baktereid saab kasvatada mitte ainult tahkel substraadil. Toitekeskkonnad erinevad üksteisest agregatsiooni oleku poolest, mis sõltub koostisest valmistamise ajal. Esialgu on need kõik vedela konsistentsiga ja kui lisada teatud protsenti želatiini või agarit, siis segu tahkub.
Vedel kultuurisöödet leidub tavaliselt katseklaasides. Kui sellistes tingimustes on vaja baktereid kasvatada, lisage lahus kultuuriprooviga ja oodake 2-3 päeva. Tulemus võib olla erinev: tekib sade, tekib kile, hõljuvad väikesed helbed või tekib hägune lahus.
Tihedat söödet kasutatakse sageli mikrobioloogilistes uuringutes bakterikolooniate omaduste uurimiseks. Sellised söötmed on alati läbipaistvad või poolläbipaistvad, et oleks võimalik õigesti määrata mikroorganismide kultuuri värvi ja kuju.
Meedia ettevalmistus
Substraate, nagu puljongil, želatiinil või agaril põhinevad liha-peptooni segud, on väga lihtne valmistada. Kui on vaja teha tahket või poolvedelat substraati, siis vedelikukslisada vastav alt 2-3% või 0, 2-0, 3% želatiini või agarit. Nad mängivad suurt rolli segu kõvenemisel, kuid nad ei ole toitainete allikad. Nii saadakse toitesöötmed, mis sobivad bakterikultuuri kasvatamiseks.
