Termina "mikroskoopia" juured on kreeka. Tõlkes tähendab see objektide uurimist ülitäpsete instrumentide abil. Viimasel ajal on fluorestsents- ja elektronmikroskoopia muutunud üha populaarsemaks.
Resolutsioon
Selle all mõistavad nad reeglina minimaalset kaugust, mille kaugusel selgelt eristatavad objektid asuvad. Mikroskoopilisse maailma tungimise määr, uuritava elemendi suuruse arvestamise võimalus sõltub seadmete eraldusvõimest. Suure suurenduse korral võivad objektide piirid ühineda. Sellest tulenev alt on teatud piirid, mille ületamisel on elementide lähendamine mõttetu.
Luminestsentsmikroskoopia meetod: mehhanism
Kui aine neeldunud energia muudetakse nähtavaks kiirguseks, tekib helendus. Seda nimetatakse luminestsentsiks. See nähtus on tingitud asjaolust, et mõned ained hakkavad valguse mõjul kiirgama erineva (tavaliselt suure) lainepikkusega kiiri. Lisaks on mõned objektid, millel tavavalgustuse korral on teatudvärvi, ultraviolettkiirguse mõjul muudavad oma värvi.
Eriandmed
Objekt, mida ultraviolettvalguses ei näe, võib kiirata eredat läiget, kui seda töödeldakse spetsiaalse ainega. Selles helendavad elemendid pimedas erinevates värvides. Kiirguse tugevus on erinev, kuid reeglina on see väike. Sellega seoses on fluorestsentsmikroskoopia efektiivne pimedas ruumis. Seda tüüpi uuringuid kasutades vaadeldakse objekti valguses, mida see ise kiirgab. Kudede, rakkude keemiline koostis mõjutab uuringu kvaliteeti. Fluorestsentsmikroskoopiat peetakse teatud määral histokeemiliseks uuringuks.
Klassifikatsioon
Fluorestsentsmikroskoopia võib olla primaarne või sekundaarne. Viimasel juhul töödeldakse eset spetsiaalsete ühenditega, mis annavad sära. Primaarne fluorestsentsmikroskoopia põhineb elemendi enda võimel valgust kiirata.
Varustus
Fluorestsentsmikroskoopiat tehakse mitmesuguste seadmete abil. Nende peamine element on valgustaja. See on varustatud UV-lambiga. Lisaks kasutavad seadmed filtrite komplekti. Mõnes seadmes on üsna palju erinevaid konfiguratsioone. Olenev alt sellest, millist värvi luminestsentsi ergastamiseks kasutatakse – ultraviolett või sinine, asetatakse valgusallika ja uuritava objekti vahele vastav filter. Kuna mikroskoopilise elemendi kuma on energeetiliselt nõrgem kui erutav valgus, jäädvustatakse see ainult ühel tingimusel. Allikast lähtuvad liigsed kiired tuleb ära lõigata kollakasrohelise filtriga. See asub seadme okulaaril. Luminestsentsi kõige tugevam mõju on siis, kui filter lõikab täielikult ära valgusallikast lähtuvad kiired.
Millest koosneb nähtava valguse installatsioon? See sisaldab eredat valgusallikat ja bioloogilist mikroskoopi. Seadme peegli ja lambi vahele asetatakse sini-violetne filter. See võib olla FS-1, UFS-3 ja nii edasi. Kollane filter asetatakse mikroskoobi okulaarile. Nende abiga langeb objektile sinine-violetne valgus. See ergastab luminestsentsi. Kuid see valgus võib häirida sära nägemist. Seetõttu lõikab see teel silma kollase filtriga ära. Valgustus on seatud Koehleri meetodil, välja arvatud üks erand. Kondensaatori membraan peab olema täielikult avatud. Uurimisel on oluline kasutada mittefluorestseeruvat immersiooniõli. Selle enda sära vähendamiseks lisatakse sellele nitrobenseeni (2-10 tilka / 1 g).
Luminestsentsmikroskoopia: rakendused mikrobioloogias
Seda tüüpi uuringu eelised on järgmised:
- Värvilise pildistamise võimalus.
- Kõrge kontrastsusega ise kiirgavad elemendid mustal taustal.
- Teatud tüüpi viiruste ja mikroobide tuvastamine ja lokaliseerimine.
- Võimalus uurida läbipaistvat ja läbipaistmatutelusorganismid.
- Eluprotsesside uurimine nende dünaamikas.
Samuti tuleks öelda, et luminestsentsmikroskoopia aitab kaasa parimate histo- ja tsütokeemia meetodite, ekspressdiagnostika väljatöötamisele.
